ONPG Discs, 50 Discs/Pack

ONPG Discs digunakan untuk deteksi cepat aktivitas b-galaktosidase dalam mikroorganisme, khususnya untuk mengidentifikasi fermentor laktosa akhir dengan cepat. Petunjuk arah Tempatkan satu disk ONPG dalam tabung reaksi steril. Tambahkan 0,1 ml larutan natrium klorida 0,85% b/v steril (garam fisiologis). Ambil koloni yang diuji dengan loop steril dan emulsikan dalam larutan garam fisiologis dalam tabung yang berisi cakram. Inkubasi pada suhu 35-37C. Untuk mendeteksi fermentor laktosa aktif, amati tabung dengan selang waktu satu jam, hingga 6 jam. Untuk mendeteksi fermentor laktosa terlambat, inkubasi tabung hingga 24 jam. Kewaspadaan Kecepatan reaksi tergantung pada ukuran inokulum. Gunakan organisme penghasil beta-galaktosidase positif dan negatif yang diketahui untuk memantau reaksi cakram. Prinsip Dan Interpretasi ONPG (Ortho-nitrophenyl beta-D-galactopyranoside) adalah senyawa tidak berwarna sintetis (galaktosida) yang secara struktural mirip dengan laktosa (1). beta-galaktosidase memotong ONPG menjadi galaktosa dan o-nitrofenil, senyawa kuning. Tes ONPG secara khusus berguna dalam identifikasi cepat fermentor laktosa samar (late fermenters). Karena anggota famili Enterobacteriaceae secara rutin dikelompokkan menurut kemampuan fermentasi laktosanya, uji ONPG penting di sini. ONPG Discs adalah Disc kertas saring steril yang diresapi dengan ONPG. ONPG memiliki struktur yang mirip dengan laktosa. Kehadiran dua enzim diperlukan untuk menunjukkan fermentasi laktosa dalam tes konvensional. Enzim pertama permease, memfasilitasi masuknya molekul laktosa ke dalam sel bakteri sedangkan enzim kedua, beta-galaktosidase, menghidrolisis laktosa untuk menghasilkan glukosa dan galaktosa. Fermentor non-laktosa sejati kekurangan kedua enzim; namun beberapa organisme kekurangan permease tetapi memiliki betagalactosidase. Organisme ini adalah fermentor laktosa akhir.